LS∕T 6138—2020 粮油检验粮食中黄曲霉毒素的测定免疫磁珠净化超高效液相色谱法(粮食)
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日期: |
2021-12-26 |
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犐犆犛67.040,犡11,中华人民共和国粮食行业标准,犔犛/犜6138—2020,粮油检验 粮食中黄曲霉毒素的测定,免疫磁珠净化超高效液相色谱法,犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀狅犳犵狉犪犻狀犪狀犱狅犻犾狊—犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犪犳犾犪狋狅狓犻狀狊犻狀犵狉犪犻狀狊犪狀犱狅犻犾狊—,犝犾狋狉犪犺犻犵犺犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狑犻狋犺犻犿犿狌狀狅犿犪犵狀犲狋犻犮犫犲犪犱犮犾犲犪狀狌狆,20200121发布20200721实施,国家粮食和物资储备局发布,前 言,本标准按照GB/T1.1—2009 给出的规则起草,本标准由国家粮食和物资储备局提出,本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAT/TC270)归口,本标准起草单位:国家粮食和物资储备局科学研究院、国家粮食和物资储备局标准质量中心、北京,东孚久恒仪器技术有限公司、中国储备粮管理集团有限公司、山东省粮油检测中心、广西壮族自治区粮,油质量检验中心、四川省粮油中心监测站、河南口岸食品检测中心、遂宁市粮食质量监督检验站、安徽省,粮油产品质量监督检测站、河南省粮油饲料产品质量监督检测中心、福建省粮油质量监测所、湖北省粮,油食品质量监督检测中心、辽宁省粮油检验监测所、黑龙江省粮食质量安全监测中心、山西粮食质量监,测中心、云南省粮油产品质量监督检验测试中心、内蒙古自治区粮油质量检测中心、昆明市粮油饲料产,品质量检验中心、北京农业质量标准与检测技术研究中心、哈尔滨市粮食质量监测站、前郭尔罗斯蒙古,族自治县粮油品质卫生检验监测站,本标准主要起草人:王松雪、叶金、轩志宏、杨卫民、李克强、张志航、周明慧、王培、伍先绍、杨军、,姬建生、李小明、胡斌、刘莹、谢婷婷、田国军、韩笑、徐春峰、李静、邵志凌、邱庆丰、李维香、陆安祥、,赵宏伟、赵环宇,Ⅰ,犔犛/犜6138—2020,粮油检验 粮食中黄曲霉毒素的测定,免疫磁珠净化超高效液相色谱法,1 范围,本标准规定了免疫磁珠净化超高效液相色谱测定粮食中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2(AFB1、AFB2、,AFG1、AFG2)的原理、试剂和材料、仪器和设备、分析步骤、测定、结果计算和精密度等内容,本标准适用于小麦、玉米、稻谷和植物油等粮油样品中AFB1、AFB2、AFG1和AFG2的测定,本标准AFB1的检出限为0.1μg/kg,AFB2的检出限为0.03μg/kg,AFG1的检出限为0.1μg/kg,AFG2的检出限为0.03μg/kg;AFB1的定量限为0.3μg/kg,AFB2的定量限为0.1μg/kg,AFG1的定量,限为0.3μg/kg,AFG2的定量限为0.1μg/kg,2 规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件,GB/T5490 粮油检验 一般规则,GB/T5491 粮食、油料检验 扦样、分样法,GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法,3 原理,样品中黄曲霉毒素经甲醇水混合液提取、上清液经免疫磁珠净化、富集后,采用超高效液相色谱分,析,外标法定量,4 试剂和材料,除另有说明外,本方法所用试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682 中规定的一级用水要求,4.1 乙腈:色谱纯,4.2 甲醇:色谱纯,4.3 氯化钠,4.4 磷酸氢二钠,4.5 磷酸二氢钾,4.6 氯化钾,4.7 盐酸,4.8 TritonX100[C14H22O(C2H4O)狀](或吐温-20,C58H114O26),4.9 甲醇水混合液70∶30,体积分数取70mL 甲醇加入30mL 水,混匀,4.10 磷酸盐缓冲溶液(以下简称PBS):称取8.00g氯化钠、1.20g磷酸氢二钠(或2.92g十二水磷酸,氢二钠)、0.20g 磷酸二氢钾、0.20g 氯化钾,用900 mL 水溶解,用盐酸调节pH 至7.4,用水定容至,1000mL,1,犔犛/犜6138—2020,4.11 0.1% TritonX100(或吐温20)的PBS 溶液(以下简称PBST):取1 mLTritonX100(或吐温,20),用PBS定容至1000mL,4.12 标准品,黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的固体粉末(纯度≥99%)或经国家认证并授予标准物质证书的标准,溶液,4.13 标准溶液配制,4.13.1 混合标准溶液,分别准确移取一定体积或质量的4 种黄曲霉毒素标准品(4.12)于10mL 容量瓶中,配制黄曲霉毒,素B1、B2、G1、G2,浓度分别为100 mg/L、30 mg/L、100 mg/L、30 mg/L,用甲醇定容至刻度,此溶液,-20 ℃密封避光保存,有效期6 个月,4.13.2 标准系列工作溶液,分别准确移取4 种黄曲霉毒素混合标准溶液(4.13.1)25μL、50μL、100μL、250μL、500μL、1000,μL 分别于10mL 容量瓶中,用甲醇定容至刻度,配制标准曲线溶液浓度见表1,此溶液4 ℃ 避光密封,保存,有效期1周,表1 标准曲线溶液浓度单位:ng/mL,化合物名称标曲点1 标曲点2 标曲点3 标曲点4 标曲点5 标曲点6,AFB1 0.25 0.5 1 2.5 5 10,AFB2 0.075 0.15 0.3 0.75 1.5 3,AFG1 0.25 0.5 1 2.5 5 10,AFG2 0.075 0.15 0.3 0.75 1.5 3,4.14 塑料离心管(2.0mL、10mL、50mL),4.15 玻璃内插管(400μL),4.1……
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